Vacuna contra la brucelosis

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Agregado: 02 de AGOSTO de 2011 (Por Mg. Amalia Beatriz Dellamea) | Palabras: 2541 | Votar | Sin Votos | Sin comentarios | Agregar Comentario
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Autor: Mg. Amalia Beatriz Dellamea (cdc@ffyb.uba.ar)

SE ENTREGó POR PRIMERA VEZ EL PREMIO RICARDO MARGI EN INMUNOLOGíA 2005

NUEVA VACUNA CONTRA LA BRUCELOSIS
Por
Amalia Beatriz Dellamea
Centro de Divulgación Científica
Facultad de Farmacia y Bioquímica (UBA)

Investigadores de la Universidad de Buenos Aires, el Conicet y la Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires desarrollaron una vacuna efectiva contra la brucelosis � La ensayaron en condiciones de laboratorio y obtuvieron resultados eficaces � Actualmente iniciaron las pruebas de campo � La brucelosis es una enfermedad endémica en la Argentina, que afecta al ganado ovino, bovino y caprino � Provoca considerables pérdidas económicas � También las personas pueden infectarse � Ya existían vacunas pero no son cien por ciento eficaces y presentan desventajas.

Un equipo de investigación integrado por miembros de la Facultad de Farmacia y Bioquímica (UBA), el Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET-UBA), la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional del Centro, del Hospital de Clínicas (UBA) y del Instituto Leloir (CONICET-UBA) recibió el Premio en Inmunología "Ricardo Margni" 2005. La distinción es conferida por el CEDIQUIFA y se instituyó en conmemoración de la trayectoria científica del desatacado inmunólogo argentino Ricardo Margni, muerto en diciembre de 2004. También se celebró el "Día del investigador", en conmemoración del nacimiento de Bernardo Houssay . En la oportunidad fueron entregados el Premio Bernardo Houssay 2005 y los premios y menciones del Concurso "Haydée De Luca" 2005.

El Premio en Inmunología "Ricardo Margni" 2005, que se entregó este año por primera vez, fue ganado por el trabajo "La inserción de un péptido de OMP31 al extremo amino terminal de la lumazina sintetasa de Brucella spp. mejora su capacidad protectora", presentado por un equipo de investigación de la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la UBA, el Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET-UBA), el Laboratorio de Inmunogenética del Hospital de Clínicas, también de la UBA, de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la Universidad Nacional del Centro, Tandil, y del Instituto Leloir (CONICET-UBA).
El premio fue conferido por Centro de Estudios para el Desarrollo de la Industria Químico Farmacéutica Argentina (CEDIQUIFA) y fue entregado ayer en un acto que se realizó en el Salón del Consejo de la Facultad de Medicina de la UBA. (Ver recuadro 2)
"Contra la brucelosis existen actualmente vacunas, pero no son cien por ciento efectivas. Además presentan desventajas, como la dificultad de efectuar el diagnóstico, esto es, que no resulta nada fácil distinguir entre un animal que ha sido vacunado y otro que está infectado con la bacteria causante de la enfermedad", explicó la doctora Juliana Cassataro, del Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET - UBA), con sede en la Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA, y del Laboratorio de Inmunogenética, del Hospital de Clínicas (UBA).
"Además, las vacunas en uso se producen con cepas de bacterias atenuadas, lo que equivale a decir que no son avirulentas y consecuentemente conservan la capacidad de enfermar", señaló, por su parte, el doctor Guillermo H. Giambartolomei, también del Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral y del Laboratorio de Inmunogenética del Hospital de Clínicas.
Desde que se practica la pasteurización, la posibilidad de que las personas se infecten con la bacteria causante de brucelosis ha descendido notablemente. Sin embargo, se ha convertido en una enfermedad básicamente profesional que afecta a los trabajadores rurales y otros operadores que aplican las vacunas a los animales, los veterinarios y el personal que trabaja en los mataderos y carnicerías, dado que están permanentemente expuestos al organismo agresor. También pueden infectarse las personas que consumen productos lácteos y derivados producidos sin los debidos controles sanitarios. (Ver recuadros 1 y 3).
La brucelosis animal es la zoonosis mayor y más difundida en el mundo. Genera barreras en la comercialización de los animales y sus productos, hecho que puede afectar las posibilidades de desarrollo, especialmente de los pequeños ganaderos, el sector más vulnerable en muchas poblaciones rurales, principalmente de América Latina. Esta circunstancia condujo a que organismos internacionales, entre ellos la Organización Mundial de la Salud (OMS), establezcan planes de erradicación de la enfermedad en ovinos, caprinos y bovinos, tanto en Europa como en América Latina.
"En nuestro laboratorio hemos desarrollado y ensayado dos tipos de vacunas contra la brucelosis", explicó Cassataro. "Probamos vacunas de subunidades, que consisten en determinados componentes de las bacterias causantes de brucelosis, por ejemplo, proteínas", agregó la investigadora. "El otro tipo que ensayamos es la vacuna de ADN", señaló, por su parte, Giambartolomei (Ver recuadro 4).

Vacuna de subunidades y vacuna de ADN
Las vacunas actualmente en uso son del tipo denominado vacunas atenuadas, que se obtienen a partir de bacterias que han perdido total o parcialmente su virulencia como resultado de inoculaciones o siembras repetidas en medios de cultivo, pero que conservan su capacidad antigénica, es decir su potencial para despertar los sistemas de defensa.
"Pero, resulta que una de las desventajas de las vacunas actuales es que las bacterias enteras atenuadas que se utilizan no son totalmente avirulentas; conservan su capacidad de replicarse y, consecuentemente, pueden provocar la infección" señaló Cassataro.
La estrategia utilizada por los investigadores argentinos fue trabajar con proteínas recombinantes de Brucella spp. Las proteínas recombinantes son iguales a las proteínas que están normalmente en la bacteria agente de la brucelosis, pero obtenidas en el laboratorio mediante técnicas de biología molecular. Consiste en un truco tecnológico por el cual los investigadores transfieren un gen de la Brucella spp. a otra bacteria más amigable y suficientemente entrenada para trabajar en el laboratorio "en colaboración" con los investigadores. Esta bacteria amiga fue la Escherichia coli, que una vez que tiene inserto el gen "ajeno" comienza a producir la proteína de interés como si se tratara de la otra bacteria, la Brucella spp. De este modo los científicos obtienen la proteína que necesitan, la purifican y pueden efectuar los ensayos de laboratorio.
El equipo de investigadores que obtuvo el Premio Margni 2005 probó en ratones varias de esas proteínas, producidas mediante técnicas biomoleculares, y encontró que los candidatos que ofrecían mayor protección a los animales del estudio eran dos: las proteínas brucella lumazina sintetasa (BLS) y OMP 31.
Pero también halló que, al combinar ambas proteínas se obtenían mejores índices de protección que si se las inoculaba por separado. Así fue que, basándose en la estructura de la BLS, le agregaron una parte de la OMP31. "Por inserción de un péptido de la OMP31 en la estructura de la BLS construimos una proteína que es quimérica entre las dos", explicó Gianbartolomei.
"Los niveles de protección que logramos con esta vacuna fueron similares a los que se obtienen con las cepas de bacterias atenuadas utilizadas normalmente", relató la investigadora. Con estos resultados obtuvieron el Premio de Inmunología de CEDIQUIFA.
El otro tipo de vacuna que desarrollaron y ensayaron los investigadores argentinos es del tipo vacuna de ADN. Esta línea de investigación constituye un avance posterior a los resultados difundidos en el trabajo premiado.
"La vacuna de ADN consiste en inocular en los animales que se desea proteger el gen de la bacteria Brucella spp que codifica para la proteína de interés. De esta manera se logra que el animal vacunado produzca por sí mismo la proteína", explicó Cassataro. Y concluyó: "Con esta estrategia hemos logrado resultados todavía más alentadores".
Actualmente los científicos argentinos, habiendo concluido los ensayos básicos, en laboratorio, iniciaron las pruebas en campo: están implementando la Fase I en inmunización de ovejas.

Recuadro 1Brucelosis, síntomas y característicasLa brucelosis, también conocida como fiebre de Malta, es una enfermedad infecciosa que se presenta con episodios recurrentes de fiebre, debilidad, sudoración y dolores vagos.Es provocada por una bacteria llamada Brucella, que está en las secreciones y los excrementos de vacas, cerdos, ovejas y cabras.Las personas pueden infectarse al ingerir leche de vaca, de oveja o de cabra o sus derivados (manteca, quesos) que contengan microorganismos viables, es decir que hayan sido fabricados con leche sin pasteurizar. También se adquiere por contacto directo con secreciones y excrementos de los animales, razón por lo que se considera que es una enfermedad profesional de veterinarios, carniceros, granjeros y ganaderos.El período de incubación de la brucelosis, es decir el tiempo en que no se presentan todavía los síntomas, se establece entre entre 5 días y varios meses (con un promedio de 2 semanas). Los síntomas y signos más típicos son: fiebre y escalofríos, con elevación de la fiebre por las tardes; dolores muy intensos de cabeza; dolores musculares y articulares; estreñimiento; pérdida del apetito, pérdida de peso y debilidad. También se registra un aumento de tamaño del bazo, el hígado y los ganglios linfáticos. La fiebre intermitente persiste durante unas semanas, y luego los síntomas cesan durante unos días, para aparecer más tarde, generalmente con picos febriles repetidos y remisiones durante meses.

Recuadro 2Historia de los premiosCEDIQUIFA instituyó para 2005, el premio "Dr. Ricardo Margni", en recordación del destacado hombre de ciencia, quien fue Director del IDEHU- Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral- (CONICET-UBA), que tiene sede en la Facultad de Farmacia y Bioquímica, y resultó galardonado con el "Premio Bernardo A. Houssay" 2001, de CEDIQUIFA, y con el Premio "Bernardo Houssay" 2004, conferido a su trayectoria por la Secretaría de Ciencia y Técnica de la Nación. Ricardo Aníbal Margni, muerto el 15 de diciembre de 2004, fue un investigador argentino que obtuvo un trascendente reconocimiento internacional en el campo de la Inmunología por su fructífera trayectoria en la investigación. En 1970, Margni descubrió los anticuerpos IgG asimétricos, hallazgo de gran relevancia debido a que estos anticuerpos en vez de "dedicarse" a proteger al organismo de los ataques de agentes agresores, por el contrario, protegen a los agresores. En 1963, Margni creó la Cátedra de Inmunología en la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la UBA, constituyendo así el antecedente de la primera cátedra de la especialidad en América Latina. A lo largo de su carrera como docente e investigador desarrolló una fructífera labor en investigación, desarrollo y formación de recursos humanos. El Premio "R. Margni" se entrega junto con el Premio anual en Investigación: "Bernardo A. Houssay". Este último premio fue instituido por el CEDIQUIFA y se otorga, desde 1989, en los actos de celebración del "Día del investigador", en conmemoración del nacimiento del Premio Nobel argentino de ciencias, doctor Bernardo Houssay, que ocurrió un 11 de noviembre. La distinción se confiere en reconocimiento a "la importante y continua acción que desarrolla la comunidad científica nacional en pos del conocimiento y el bien común". El Premio Houssay 2005 fue conferido al doctor Norberto Ricardo Farías, director del Instituto de Química Biológica, Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia, de la Universidad Nacional de Tucumán (UNT), e Instituto Superior de Investigaciones Biológicas (INSIBIO) CONICET - UNT, y su equipo de investigadores, en reconocimiento a su trayectoria y la relevancia de trabajos con relación al aislamiento de una cepa de Escherichia coli, a partir de la cual se desarrolló y purificó un antibiótico designado como microcina J25 (MccJ25), cuya posible futura utilización en terapéutica se estima como un avance científico tecnológico. El equipo de investigadores que dirige el doctor Ricardo Norberto Farías está integrado por Bellomio, Augusto; Ciuchiolo, María José; Cristóbal, Ricardo Ezequiel; Delgado, Mónica Alejandra; Dupuy, Fernando Gabriel; Fernández de Arcuri, Beatriz Eugenia; López, Fabián Enrique; Pomares, María Fernanda; Morero, Roberto D.; Niklison Chirou, María Victoria; Rintoul, María Regina; Salomón, Raúl Armando; Socias, Sergio Benjamín, Solbiati, José Osvaldo, Vallejos, Alicia Cecilia, Vincent, Paula Andrea y Zenoff, Ana María. También en la oportunidad de festejar el "Día del investigador" CEDIQUIFA se entregaron los premios y menciones especiales del Concurso "Haydée De Luca" 2005, sobre Estrategias para la Promoción de la Salud mediante la Educación.

Recuadro 3
Agente causal de la brucelosis
El agente causal de la brucelosis es la bacteria Brucela sp. Se trata de un cocobacilo, aeróbico, Gram negativo. Infecta en forma primaria a los animales.
Se conocen 7 especies: Brucela melitensis, Brucela abortus, Brucela suis, Brucela neotomae, Brucela ovis, Brucela canis y Brucela maris. Las tres primeras, denominadas "brucelas clásicas", fueron subdivididas en biotipos por sus características bioquímicas y su comportamiento frente a los sueros monoespecíficos A (abortus) y M (melitensis).
Brucela melitensis: responsable de la mayoría de los casos humanos diagnosticados bacteriológicamente. Es la especie más patógena e invasiva. Afecta comúnmente a las cabras.
Brucela abortus, principal responsable de la enfermedad en bovinos. Se la h00a r0elacionado hasta ahora con infecciones leves y con un alto porcentaje de casos asintomáticos, característicos de individuos profesionalmente expuestos.
Brucela suis se subdivide en 4 biotipos (1-4).
El reciente aislamiento de B. maris, característica de los mamíferos marinos, ha extendido el rango ecológico de esta bacteria.
Debido a que cada Brucela sp. tiene rasgos epidemiológicos característicos, con cada nuevo tipo incrementa la complejidad de la interacción con el ser humano. El cuadro de estas interacciones permanece incompleto, ya que tipos nuevos pueden emerger y los ya existentes se adaptan a los cambios.

Fragmento tomado de: Ministerio de Salud. Chile. http://epi.minsal.cl/epi/html/public/brucelosis.html . Fecha de consulta: 16 de noviembre de 2005.

La brucelosis humana fue conocida antiguamente como la fiebre de Malta, fiebre ondulante y fiebre mediterránea, su cuadro clínico fue descrito por primera vez por Marston en 1859. En 1887 Sir David Bruce fue el primero en aislar la bacteria de soldados británicos enfermos que murieron de brucelosis.

Recuadro 4
Vacunas de subunidades
Las vacunas de subunidades, llamadas también vacunas de componentes, contienen únicamente proteínas o péptidos particulares del microorganismo patógeno y no el organismo completo. Actualmente, gracias a los avances en técnicas de biología molecular, los investigadores, en vez de usar componentes de proteínas o de péptidos de los microorganismos, los fabrican en el laboratorio.

Vacunas de ADN
Las vacunas de ADN introducen segmentos de ADN de la Brucella spp. en el organismo de los animales que se desea proteger. Se inyecta directamente al organismo fragmentos de ADN que contienen genes de la Brucella spp. Las células absorben ese ADN y lo usan para producir proteínas de la Brucella. Estas proteínas estimulan al organismo para que produzca una respuesta inmunitaria de defensa contra la enfermedad.

Ficha técnica del equipo galardonadoEl equipo que se adjudicó el Premio Margni 2005 está integrado por los doctores:Juliana Cassataro (Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET - UBA) Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA - Laboratorio de Inmunogenética. Hospital de Clínicas. UBA).Karina A. Pasquevich (Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET - UBA) Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA - Laboratorio de Inmunogenética. Hospital de Clínicas. UBA).Silvia Estein (Laboratorio de Inmunología. Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Centro, Tandil).Astrid Zwerling (Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET - UBA) Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA - Laboratorio de Inmunogenética. Hospital de Clínicas. UBA).Carlos A. Fossati (Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET - UBA). Fernando A. Goldbaum (Instituto Leloir, UBA CONICET).Guillermo H. Giambartolomei (Instituto de Estudios de la Inmunidad Humoral (CONICET - UBA) Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA - Laboratorio de Inmunogenética. Hospital de Clínicas. UBA).Financiación de la investigaciónLos estudios fueron financiados con fondos de la Agencia Nacional de Promoción Científica y la Fundación Antorchas.Los integrantes del equipo son investigadores y docentes del CONICET, la Universidad de Buenos Aires y la Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires.

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